產(chǎn)品信息

      CRISPR相關(guān)蛋白Cas9已經(jīng)廣泛應(yīng)用于基因組編輯，相比于Cas9蛋白，Cas12a具有類似的基因組編輯效率，但具有較低的脫靶效率，在基因治療應(yīng)用中具有巨大的潛力。 

      不同于Cas9蛋白，Cas12a不需要tracrRNA，只需要單個(gè)由41-44nt核苷酸組成的crRNA引導(dǎo)。與Cas9需要富含G的PAM相反，Cas12a-crRNA復(fù)合物通過(guò)識(shí)別富含T（5'-TTTN-3'）的PAM基序來(lái)切割靶DNA。Cas12a執(zhí)行剪切后的DNA雙鏈斷裂引入了4或5個(gè)核苷酸突出的粘性末端。

      本制品來(lái)源于Lachnospiraceae bacterium，在蛋白兩端分別加了核定位信號(hào)（NLS），當(dāng)Cas12a 以NLS序列表達(dá)時(shí)，Cas12a-RNP復(fù)合體可以在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核。無(wú)需體內(nèi)轉(zhuǎn)錄或翻譯，提高了該方法在質(zhì)粒系統(tǒng)上的效率。另外，本產(chǎn)品還具有一種trans切割的活力，即一旦靶標(biāo)dsDNA、crRNA和Cas12a蛋白形成三元復(fù)合體時(shí)，特異性切割靶標(biāo)dsDNA的同時(shí)，會(huì)非特異切割體系中其他的ssDNA。這促使Cas12a可以作為一種新型的基因檢測(cè)和成像的工具。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1) 純蛋白體系，避免CRISPR基因敲除時(shí)引入質(zhì)?；虿《靖蓴_；

2) 可顯著降低脫靶效應(yīng)。

產(chǎn)品用途：

1) 基于蛋白與sgRNA轉(zhuǎn)染的非病毒載體CRISPR基因敲除；

2) 基于蛋白與sgRNA轉(zhuǎn)染的非病毒載體CRISPR基因敲入；

3) sgRNA 剪切靶點(diǎn)DNA 效率檢測(cè)，降低體內(nèi)篩選成本；

4) 體外剪切靶DNA的特異位點(diǎn)。

保存溫度：

-20℃保存。

應(yīng)用實(shí)例：

圖例）Cas12a Nuclease做DNA片段體外切割活性檢測(cè)。

帶有靶位點(diǎn)的DNA片段約為1500bp，酶切后的片段為1000bp和500bp。

For research use only.