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總巰基測定試劑盒(分光光度法50T/24S)
| 貨號 | SH0057 | 售價（元） | 156 |
| 規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0057 |
總巰基測定試劑盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
測定意義：
生物體內(nèi)巰基主要包括谷胱甘肽巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì)，而且參與活性氧清除，后者對于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量，能夠間接測定蛋白質(zhì)巰基含量。
測定原理：
巰基基團與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應(yīng)，生成黃色化合物，在412nm處有最大吸收峰。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0057-50T/24S |
Storage |
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試劑一：液體 |
40ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
2ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、研缽、可見分光光度計、恒溫水浴鍋、1ml玻璃比色皿、乙醇和蒸餾水。
樣品的制備：
1. 按照組織質(zhì)量（g）：水體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液）進行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2. 血清，培養(yǎng)液：稀釋5倍后測定，可取0.1ml樣本，加入0.4ml蒸餾水，混勻，置冰上待測。
測定操作表：
1、分光光度計預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至412nm，雙蒸水調(diào)零。
2、操作表
在1ml玻璃比色皿中加入如下試劑
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對照管 |
測定管 |
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樣品（μl） |
200 |
200 |
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試劑一（μl） |
750 |
750 |
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試劑二（μl） |
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50 |
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乙醇（μl） |
50 |
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混勻，25℃靜置10min， 測定412nm吸光值，ΔA=A測定-A對照。每個測定管設(shè)一個對照管。 |
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計算公式：
總巰基標(biāo)準(zhǔn)曲線：y =3.6222 x- 0.0037，R2 = 1，x為標(biāo)品濃度，單位μmol/ml， y為吸光度ΔA。
1. 組織：
（1）按樣本重量計算
總巰基含量（μmol/g 鮮重）=（ΔA+0.0037）÷3.6222 ×V樣總÷W
=0.276×（ΔA+0.0037）÷W
（2）按樣本蛋白濃度計算
總巰基含量（μmol/mg prot）=（ΔA+0.0037）÷3.6222×V樣總÷Cpr
=0.276×（ΔA+0.0037）÷Cpr
2. 血清、培養(yǎng)液：
總巰基含量（μmol/L）=（ΔA+0.0037）÷3.6222 ×5×103
=1380×（ΔA+0.0037）
V樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質(zhì)量，g ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；5：血清，培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù)；103 ：1mmol/L=103μmol/ L
注意事項：
最低檢出限為10μmol/L。