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豬藍(lán)耳病毒熒光定量PCR檢測試劑盒

貨號 SH0630 售價(jià)(元) 2640
規(guī)格 50T CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0630

豬藍(lán)耳病毒熒光定量PCR檢測試劑盒

50 頭份/盒

作用與用途:

用于豬脾臟、淋巴結(jié)、肉品、血液及血液制品中豬藍(lán)耳病毒核酸的檢測。

用法與判定:

使用病毒 DNA/RNA 核酸提取試劑盒提取核酸,按照如下步驟操作:

熒光 PCR 反應(yīng)體系的配置:取出試劑盒中的各組分,置室溫(15-25℃)融化后瞬時(shí)離心,備用。每 次檢驗(yàn)設(shè)陰、陽性對照。設(shè)待檢樣品、陽性對照和陰性對照的樣品總份數(shù)為 n,按如下反應(yīng)體系配置::

 

酶系 one-step RT-qPCR Mix

1.5ul xn+1

5x one-step RT-qPCR Buffer

5ul xn+1

引物探針預(yù)混液

7.5ul xn+1

總量

25ul xn+1

將以上配置的反應(yīng)體系充分混勻后,按 25ul/管分裝至反應(yīng)管中。分別取提取的核酸樣品 5ul 加入相

應(yīng)反應(yīng)管中,蓋緊管蓋后瞬時(shí)離心。

1.熒光 PCR 反應(yīng)條件:

 

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

說明

是否收集信號

45℃

15 min

1

反轉(zhuǎn)錄

95℃

3min

1cycle

預(yù)變性

95℃

15sec

40-45cycle

變性

60℃

30sec

退火,延伸

是(FAM

對于 ABI 熒光 PCR 儀,選擇 FAM 通道讀取檢測結(jié)果,淬滅基團(tuán)選擇“MGB”;

對于其它品牌的熒光 PCR 儀,選擇 FAM 通道讀取檢測結(jié)果,淬滅基團(tuán)選擇“None” 本產(chǎn)品使用特殊的 ROX Reference Dye,適用于所用 qPCR 儀器,無需在不同的儀器上調(diào)整 ROX 的

濃度。

2.試驗(yàn)成立條件:陽性對照 Ct 值≤35 并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線,陰性對照無 Ct 值或無典型的擴(kuò)增曲 線,則判為試驗(yàn)成立。

3.判定:待檢測樣品 Ct 值≤35 并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線,判為陽性;待檢樣品無 Ct 值或 35<Ct 值

≤40 并且無典型的擴(kuò)增曲線,判為陰性。

注意事項(xiàng)

1.試劑盒應(yīng)在-20℃以下保存和運(yùn)輸。

2.本試劑盒僅用于科研檢測使用,操作人員必須經(jīng)過培訓(xùn),試劑盒使用前請仔細(xì)閱讀說明書全文。

3.不要使用過期組分或者不同批次組分混合使用。

4.使用時(shí)盡量避免反復(fù)凍融,如凍融,應(yīng)不超過 3 次。

5.樣品采集和處理過程應(yīng)戴一次性手套,并及時(shí)更換,樣品間嚴(yán)禁交叉污染。

6.熒光 PCR 實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格分區(qū)操作,各區(qū)應(yīng)有專用的手套、移液器等,不得交叉使用,避免污染;工作 人員應(yīng)遵循單方向工作原則,各工作區(qū)相對隔離。

7.進(jìn)行熒光 PCR 實(shí)驗(yàn)的工作桌面及相關(guān)物品應(yīng)定期用 1%次氯酸鈉、75%酒精、1mol/L 鹽酸依次滅菌 和消毒,或定期用紫外燈滅菌和消毒。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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