橫向流動(dòng)試紙條LFD試紙，為什么要做成Red-Blue雙色

   剛接觸Lateral flow產(chǎn)品的時(shí)候，要么是膠體金，要么是紅乳膠。也沒(méi)有想過(guò)還有更多變化。直到看到梅里埃之前的VIKIA系列的快診產(chǎn)品，才意識(shí)到彩色乳膠，可紅，可藍(lán)，可黃，可綠，可彩虹。
有些產(chǎn)品就采用了多色顆粒在一個(gè)產(chǎn)品上。接觸過(guò)一個(gè)流感的產(chǎn)品，C線綠色，甲流藍(lán)色，乙流紅色。
還有一種就是C線變色的設(shè)計(jì)，如BinaxNow的新冠抗原試劑

   在使用之前，就有一條藍(lán)色C線。在完成測(cè)試之后，C線從藍(lán)色變成紅色。
今天介紹一款核酸試紙，來(lái)自南京沃博生物的Red-Blue雙色核酸試紙。它采用雙色系統(tǒng)不僅僅是為了好看，還有一番別出心裁。
   沃博生物的核酸試紙的原理也是非常類似的，但是親和素用來(lái)偶聯(lián)了金顆粒，抗FITC抗體用來(lái)包被了T線。同時(shí)采用紅色膠體金顆粒對(duì)應(yīng)T線和藍(lán)色乳膠顆粒對(duì)應(yīng)C線。

當(dāng)使用快速等溫?cái)U(kuò)增核酸，特別是RPA系統(tǒng)時(shí)，很容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
通過(guò)使用Red-Blue雙色系統(tǒng)，當(dāng)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，就可以進(jìn)行快速的假陽(yáng)性分析。 

假陽(yáng)1，如果T線紅色比較強(qiáng)，可能核酸擴(kuò)增出假陽(yáng) 

假陽(yáng)1，如果T線紅色比較弱，可能引物形成二聚體

假陽(yáng)2，如果T線藍(lán)色假陽(yáng)，修飾了FITC的這段引物具備了捕獲Mouse IgG的特性，成了一個(gè)Aptamer

這樣可以幫助科研人員快速的進(jìn)行Trouble shooting, 也是多色系統(tǒng)一種創(chuàng)新的應(yīng)用。

還把單T線升級(jí)到了雙T線，實(shí)現(xiàn)雙靶標(biāo)雙系統(tǒng)檢測(cè)。

并且雙系統(tǒng)T線采用獨(dú)立的系統(tǒng)，相互不會(huì)干擾和競(jìng)爭(zhēng)

單T線，

biotin-DNA-FITC

雙T線，

biotin-DNA-FITC 

Digoxin-DNA-TAMRA 

除了上述的彩虹核酸試紙，也有用于CRISPR的Cas12/13專用核酸檢測(cè)試紙條。并且好調(diào)試好了檢測(cè)濃度。

檢測(cè)探針質(zhì)量

在陰性對(duì)照中，稀釋探針的濃度至200 nM，進(jìn)行切割反應(yīng)。當(dāng)試紙條結(jié)合墊端浸入Cas12/Cas13切割產(chǎn)物后的5~7 min內(nèi)，試紙條T線顯色，即說(shuō)明探針含游離的Biotin或者游離的FITC，探針純度不足導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。建議更換探針合成供應(yīng)商，重新合成探針。

探針載量接受范圍

探針使用濃度為20~50nM的情況下，試紙條結(jié)合墊端浸入Cas12/Cas13切割產(chǎn)物后的30 min內(nèi)，T線均不會(huì)顯色。

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